间充质干细胞归巢的研究与进展

doi:10.3969/j.issn.2095-4344.2016.19.021

中国组织工程研究 ›› 2016, Vol. 20 ›› Issue (19): 2879-2888.doi: 10.3969/j.issn.2095-4344.2016.19.021

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间充质干细胞归巢的研究与进展

邓蓉蓉¹，谢伊旻²，谢林¹

1南京中医药大学附属中西医结合医院，江苏省南京市 210000
2南京中医药大学，江苏省南京市 210000

收稿日期:2016-04-02 出版日期:2016-05-06 发布日期:2016-05-06
通讯作者: 谢林，博士后，主任医师，教授，南京中医药大学附属中西医结合医院，江苏省南京市 210000
作者简介:邓蓉蓉，女，1990年生，江苏省南通市人，汉族，在读硕士，主要从事干细胞应用脊柱退行性疾病研究。
基金资助:
江苏省自然科学基金(BK20151604)，舒筋活血方调控骨髓间充质干细胞靶向归巢机理的研究；临床医学科技专项--新型临床诊疗技术攻关(BL2012069)，全内窥镜下微创治疗颈(胸、腰)椎间盘突出症技术研究

Development of mesenchymal stem cell homing

Deng Rong-rong¹, Xie Yi-min², Xie Lin¹

1Affiliated Hospital of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine, Nanjing University of Chinese Medicine, Nanjing 210000, Jiangsu Province, China
2Nanjing University of Chinese Medicine, Nanjing 210000, Jiangsu Province, China

Received:2016-04-02 Online:2016-05-06 Published:2016-05-06
Contact: Xie Lin, M.D., Chief physician, Professor, Affiliated Hospital of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine, Nanjing University of Chinese Medicine, Nanjing 210000, Jiangsu Province, China
About author:Deng Rong-rong, Studying for master’s degree, Affiliated Hospital of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine, Nanjing University of Chinese Medicine, Nanjing 210000, Jiangsu Province, China
Supported by:
the Natural Science Foundation of Jiangsu Province, No. BK20151604; the Special Project of Clinical Science and Technology-- Research of New Clinical Diagnosis and Treatment Technology, No. BL2012069

摘要/Abstract

摘要：

文章快速阅读：

文题释义：
干细胞巢：干细胞巢作为一种特殊的微环境，是干细胞存在的基础，这一微环境主要包括与干细胞相邻的细胞、细胞外基质和多种细胞因子。“巢”通过不同信号途径调控着干细胞的行为，使干细胞的生长、更新和分化在生理条件下处于稳定平衡状态。
趋化作用：当机体组织器官缺血缺氧或者发生损伤后，通过释放炎性因子(如白细胞介素1，肿瘤坏死因子α)和趋化因子(如基质细胞衍生因子1)等多种成分入血活化间充质干细胞，同时可以在损伤部位周围形成配体的浓度梯度，从而趋化间充质干细胞沿浓度梯度向着缺血缺氧的目标组织定向迁移。

摘要
背景：间充质干细胞是一种低免疫原性的成体干细胞，具有多向分化潜能，已广泛应用于干细胞移植、免疫治疗、组织工程等各个领域。
目的：综述间充质干细胞归巢机制及促进间充质干细胞归巢策略的研究新进展，为安全、高效间充质干细胞移植提供理论依据。
方法：检索 CNKI 数据库和 PubMed 数据库的相关文献，中文检索词为“间充质干细胞，归巢”，英文检索词为“mesenchymal stem cells (MSCs)，homing”。查阅2000至2016年间充质干细胞归巢研究的相关文献，包括综述、基础研究和临床研究，最终纳入74篇文献。
结果与结论：间充质干细胞的归巢研究仍需要进一步探索，尤其是间充质干细胞动员的分子机制。因此，需要进一步深入开展间充质干细胞的基础研究，建立体外细胞归巢体系，开展间充质干细胞及转基因后移植的体内效应研究等均具有重要的意义。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程
ORCID: 0000-0003-3815-661X(谢林)

关键词: 干细胞, 移植, 间充质干细胞, 归巢, 趋化因子, 生长因子, 黏附分子, 江苏省自然科学基金

Abstract:

BACKGROUND: As a kind of adult stem cells with low immunogenicity, mesenchymal stem cells are able to differentiate into different cell lineages in the treatment of many diseases. Moreover, mesenchymal stem cells have been extensively used in many fields such as stem cell transplantation, immune therapy, and tissue engineering.
OBJECTIVE: To review the progress of homing mechanism and the strategies to promote mesenchymal stem cell homing, thus providing a theoretical basis for transplanting mesenchymal stem cells safely and efficiently.
METHODS: The CNKI and PubMed databases were retrieved by computer for articles regarding mesenchymal stem cell homing published from 2000 to 2016, including reviews, basic and clinical studies. The key words were “mesenchymal stem cells, homing” in Chinese and English, respectively. Then 74 papers were suitable for final analysis.
RESULTS AND CONCLUSION: Mesenchymal stem cell homing needs further research, especially the molecular mechanism of cell mobilization. Therefore, basic research about mesenchymal stem cells should be further developed, and a standardized homing system should be established in vitro. In addition, it is of great significance to study the in vivo effects of transplanted gene-transfected mesenchymal stem cells.

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

Key words: Mesenchymal Stem Cells, Chemotactic Factors, Tissue Engineering

中图分类号:

R318

邓蓉蓉，谢伊旻，谢林. 间充质干细胞归巢的研究与进展[J]. 中国组织工程研究, 2016, 20(19): 2879-2888.

Deng Rong-rong, Xie Yi-min, Xie Lin. Development of mesenchymal stem cell homing[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2016, 20(19): 2879-2888.

图/表（结果） 1

2.1 间充质干细胞的生物学特性 间充质干细胞是一类具有自我更新、高度增殖、免疫调控、造血支持及多向分化潜能的非造血干细胞，最早在骨髓中发现^[1]，随后在多种组织中发现，如脂肪、脐带沃顿胶、脐血等^[2-3]。目前国际公认的人间充质干细胞表型特征为：细胞表面CD73、CD90、CD105等抗原呈阳性，而CD14、CD79a、CD11b、CD19、CD34、CD45、HLA-DR等表达阴性^[4]。大多数人类间充质干细胞可以作为中胚层组织如骨骼、脂肪和软骨发育的前体细胞，同时还可以跨越胚层横向分化为各种组织细胞^[5-7]，如神经细胞和内皮细胞等^[8]。

间充质干细胞是一类低免疫原性的成体干细胞，间充质干细胞的低免疫原性与其低表达主要组织相容性复合体MHC-Ⅰ而不表达MHC-Ⅱ、CD40、CD80、CD86有关，同时间充质干细胞对各类免疫细胞均具有免疫调节作用。研究发现间充质干细胞可通过调节T细胞的活化和增殖来抑制免疫反应^[9-10]。间充质干细胞对T细胞的调节可通过细胞间直接接触^[11-12]，亦可在非直接接触下间充质干细胞分泌可溶性因子来发挥作用。内源性间充质干细胞可产生相应的生长因子和细胞因子在组织修复过程中发生作用，如骨形态发生蛋白在骨、肌腱、软骨的修复中发挥作用^[13]，促血管再生因子可用于缺血性疾病的治疗。基因修饰的干细胞移植是目前临床研究的热点，因此，间充质干细胞的低免疫原性及促进机体修复的特点使其成为备受关注的可用于移植的干细胞之一，而移植的间充质干细胞能否顺利归巢至微环境，是决定间充质干细胞移植的成败之一。

2.2 间充质干细胞的归巢及归巢机制 干细胞归巢是指自体或外源性干细胞在多种因素的作用下，能定向趋向性迁移，越过血管内皮细胞至靶向组织并定植存活的过程，类似人体局部炎症反应后大量白细胞迁移至炎症周围，见图2。2009年Krap等^[14]建议将“间充质干细胞归巢”定义为：间充质干细胞在目标组织的脉管系统里被捕获，随后跨越血管内皮细胞迁移至目标组织的过程。间充质干细胞与血管内皮细胞具有相似性，因而易于迁移和植入。干细胞“巢”作为一种特殊的微环境，是干细胞存在的基础，“巢”通过不同信号途径调控着干细胞的行为，使干细胞的生长、更新和分化在生理条件下处于稳定平衡状态。对于归巢机制，尤其是干细胞的动员，目前无法准确的阐述。大部分研究文献基于白细胞迁移、人类干细胞以及转移肿瘤细胞研究干细胞的迁移行为，针对各种细胞表面受体及细胞因子进行探索。

间充质干细胞表面广泛表达趋化因子和生长因子等受体，其归巢过程亦涉及趋化因子、黏附分子、生长因子和酶等多种配体及其受体的参与^[15-17]，即配体与在间充质干细胞上表达的相应受体结合具有驱动间充质干细胞归巢的作用。移植的干细胞顺利归巢至微环境，要求损伤部位的信号分子和间充质干细胞表面受体相一致，这也是决定干细胞移植的成败之一。目前研究最多的是基质细胞衍生因子1、CXC趋化因子受体、肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor，HGF)及其受体离散因子受体c-met(HGF/c-met)、单核细胞趋化蛋白(monocyte chemotactic protein，MCP)、CC趋化因子受体(CCR)、黏附因子等^[18]。

2.2.1 CXC趋化因子家族 基质细胞衍生因子1(stromal cell derived factor-1，SDF-1)又称CXCL-12，是趋化因子家族中的CXC亚族。CXCR4是目前研究最多的SDF-1的受体，首先是在小鼠骨髓基质细胞分泌的细胞因子中发现的，同时在多种细胞表面表达，包括血液细胞、造血干细胞、胚胎干细胞^[19-20]。现有研究表明，趋化因子家族及其受体不但能介导白细胞的迁移，同时在间充质干细胞归巢中也发挥着重要作用，也是研究较多的细胞因子。SDF-1/CXCR4轴主要功能之一就是调节前体细胞的移植、趋化及归巢至受伤的部位^[21]，是进化上高度保守的介导干细胞迁移分布的关键信号，在间充质干细胞募集和定向迁移中发挥了关键性作用。在间充质干细胞归巢的研究过程中，相比其他几种趋化因子，SDF-1表现出更强的趋化能力，因此SDF-1及其受体CXCR4对间充质干细胞趋化的研究是目前的热点。

国内外学者通过大量体内外实验发现SDF-1/ CXCR4轴在间充质干细胞归巢过程中起重要作用。Wang等^[22]发现SDF-1α/CXCR4轴调节移植的骨髓间充质干细胞迁移至大鼠脑缺血损伤部位。Shi等^[23]发现提高CXCR4的表达可能会增强间充质干细胞的迁移能力。Tang等^[24]研究发现，外源性血管内皮生长因子通过调节SDF-1/CXCR4轴促进心脏干细胞的募集修复心肌组织。有研究采用慢病毒转染将CXCR4导入人骨髓间充质干细胞，体外Transwell迁移实验证实导入CXCR4的干细胞向SDF-1的迁移能力显著增加^[25]。但也有研究发现，缺血性心肌病患者血液中SDF-1水平升高和CD34⁺水平升高有一致性，与骨髓间充质干细胞无明显一致性^[26-27]。因此，该轴在间充质干细胞归巢的作用还有待进一步挖掘。

2.2.2 CC趋化因子家族 近来研究发现，与趋化因子相关的间充质干细胞、MAPCs及部分干细胞，具有表达或者被诱导表达至少CCR1、CCR2、CCR3、CCR5其中之一的能力。

MCP-1(CCL2)、MCP-3(CCL7)、MIP-1α(CCL3)、MIP-1β(CCL4)、RANTES(CCL5)等属于趋化因子家族，对多种细胞都有趋化作用，主要是通过和它的特异性受体结合发挥生物学作用。现代研究发现，在机体损伤和炎症部位都可以上调MCP-1、MCP-3，目前在心血管病变中研究较多。Schenk等^[28]通过研究发现，实验动物心肌梗死1个月后梗死区大量表达MCP3，进行间充质干细胞移植治疗后，梗死区大量表达MCP-3的心脏功能明显比对照组改善显著。研究还发现，MCP-3大量募集间充质干细胞归巢至损伤部位，是通过促进心肌成纤维细胞和胶原基质的募集而进行心脏重建。Huang等^[29]通过基因修饰间充质干细胞，使其表面过表达MCP3受体CCR-1，间充质干细胞归巢至受损心肌的能力和存活率增强。Guo等^[30]发现，MCP-1/CCR2轴在间充质干细胞归巢治疗扩张性心肌病中发挥作用，为治疗扩张性心肌病提供了新的治疗思路。

2.2.3 HGF/c-met HGF即肝细胞生长因子，是一种间质源性生长因子，是从部分肝切除大鼠的血清中分离出的一种能刺激DNA合成和原代培养的因子，肝细胞生长因子受体是由原癌基因c-Met编码产生的一种酪氨酸激酶，也被称为c-Met。HGF/c-met具有多种生物学作用，可以抗凋亡、促进增殖和血管再生，因此在许多慢性病中具有抗纤维化、重建功能的作用。

肝细胞生长因子能够促使间充质干细胞增殖、迁移、分化^[31-34]。近来研究发现，肝细胞生长因子能通过HGF/c-met轴介导干细胞的靶向分布^[35]。Trapp等^[36]研究发现，HGF/c-met介导无限制体干细胞(unrestricted somatic stem cells,USCS)向损伤脑神经组织的趋化分布和定向分化作用，为神经细胞再生以及功能恢复提供可能。黄小兵等^[37]发现中药龟板含药血清可能通过HGF/c-met轴促间充质干细胞迁移。另外，肝细胞生长因子长期诱导可促进间充质干细胞分化。Liu等^[38]研究发现，HGF/c-met在间充质干细胞归巢至肠缺血再灌注肝损伤部位介导的干细胞修复发挥着重要作用。有学者通过基因转染技术将肝细胞生长因子基因转染间充质干细胞，前期的动物实验表明^[39]，转染肝细胞生长因子基因干细胞的实验组治疗效果明显高于对照组。

2.2.4 黏附分子 间充质干细胞动员和迁移后，血管中的间充质干细胞黏附于毛细血管壁跨内皮细胞层归巢至目标组织，间充质干细胞和细胞外基质通过表达细胞黏附分子配体与细胞黏附分子结合，介导干细胞归巢到特定的靶点。黏附分子是指由细胞产生存在于细胞表面介导细胞之间与基质间相互接触和结合的一类分子，包括选择蛋白家族、免疫球蛋白超家族和整联蛋白家族及其他未归类的黏附分子。目前所报道的有关间充质干细胞黏附到内皮组织具有重要功能的黏附分子有P-选择蛋白、整合素等。

有研究者观察发现，在遗传性缺乏P-选择蛋白的小鼠中，间充质干细胞在血管内沿着血管壁滚动行为明显减少，这表明P-选择蛋白可能与间充质干细胞沿血管壁滚动黏附有关。间充质干细胞表面存在多种整合素成员的表达，约50%人间充质干细胞上表达VLA-4，因此VLA-4/VCAM轴在归巢中研究较多。一些研究表明VLA-4 除了可以调控间充质干细胞归巢中的黏附过程，同时也参与归巢其他步骤如捕获、滚动等，是间充质干细胞完成归巢过程不可或缺的成分^[40-42]。研究发现肿瘤坏死因子α能够刺激血管上皮细胞和间充质干细胞^[43]，使两者的VCAM-1及其受体VLA-4表达增加，促进两者间的黏附和固定。吕浩敏等^[44]研究发现炎性因子能够增强大鼠骨髓间充质干细胞表面VCAM-1的表达，同时可促进骨髓间充质干细胞与血管内皮细胞的黏附，促进间充质干细胞向心肌梗死区迁移，可能与提高间充质干细胞表面VCAM-1有关。有研究表明，培养间充质干细胞的同时加入VCAM-1抗体后，间充质干细胞对心脏毛细血管内皮细胞的黏附力消失，提示VLA-4/VCAM轴在间充质干细胞黏附过程中的重要作用。多个研究表明，当间充质干细胞表面整合素减少时，归巢率明显减低。Ip等^[45]在间充质干细胞的归巢研究中发现，应用抗体封闭VLA-4后的间充质干细胞归巢率显著降低。

2.2.5 细胞外基质及其他因素 细胞外基质的主要成分包括胶原、纤维素、硫酸类肝素和蛋白聚糖类等^[46]。细胞外基质对细胞的黏附、迁移、铺展、增殖、分化和凋亡等产生重要作用^[47-51]。碱性成纤维细胞生长因子在细胞外基质中含量较为丰富，有研究表明，碱性成纤维细胞生长因子可能通过激活蛋白激酶B(Akt)信号通道增强间充质干细胞的迁移能力^[52]。

间充质干细胞的迁移受到多因素影响和多途径调控，有研究发现，Notch 信号通路可以调控一些细胞上CXCR4和VLA-4的表达和功能^[53-54]，可能也参与了对间充质干细胞迁移的调控。

2.3 促进间充质干细胞归巢的策略 越来越多研究表明，间充质干细胞能够选择性归巢于多种组织的损伤部位^[55]，由于归巢数量极少，间充质干细胞发挥作用有限，因此提高干细胞归巢的效率显得相当迫切。利用各种措施提高干细胞归巢的效率，将会提高干细胞移植的效果。

2.3.1 间充质干细胞的预处理 间充质干细胞反复传代会导致其干性丢失，影响其治疗效果。间充质干细胞在体外发生老化以及细胞间的氧化损伤积累，使细胞的增殖和归巢潜能有所减弱。筛选优化间充质干细胞的分离培养方法是提高间充质干细胞归巢的一个重要切入点^[56]。靳建亮等^[57]发现原代骨髓间充质干细胞移植在小鼠急性心肌梗死治疗中的作用优于第5代骨髓间充质干细胞移植，同时发现经“骨髓细胞反复转移”方法培养的原代骨髓间充质干细胞移植，可以作为一种新的培养策略用于急性心肌梗死后的心肌组织再生。

基因修饰的干细胞具有干细胞治疗和基因治疗的双重优势，在生物治疗领域受到越来越多的关注，转染有利于归巢的基因是提高间充质干细胞归巢的另一个重要切入点。研究发现在间充质干细胞上转染一些促进干细胞迁移、黏附的基因，将有利于干细胞的归巢。Chen等^[58]的研究发现，转染SDF-1/HOXB4基因明显强化造血干细胞的迁移及其在小鼠体内的造血功能。孙瑞婷^[59]研究采用肝细胞生长因子修饰的间充质干细胞治疗放射性肠损伤，观察肝细胞生长因子基因修饰的人脐带间充质干细胞对放射性肠损伤的防治作用，并初步研究其作用机制，为基因修饰干细胞治疗放射性肠损伤提供了新的实验数据。

2.3.2 植入途径的选择 干细胞目前最主要的移植方式是动脉移植、静脉移植、心内移植和局部注射移植。有学者报道各个移植方式的优缺点，静脉注射常发生静脉阻塞于肺部而影响疗效；动脉注射操作复杂，创伤大，出血多；局部注射归巢率高，疗效好。这些仍需要通过大量实验数据证实。

何秀华等^[60]通过尾静脉和门静脉2种不同途径输注DAPI标记的间充质干细胞，观察DAPI阳性间充质干细胞在肝切除大鼠模型中向肝脏的归巢、定植，实验结果显示门静脉移植组间充质干细胞归巢到肝脏及定植多于尾静脉移植组，结果表明移植途径对间充质干细胞归巢、定植到肝脏有一定影响。为了准确观察不同途径移植的间充质干细胞在体内能否产生大量的肝细胞，Chamberlain等^[61]在乳羊中分别经腹腔和肝脏途径移植成人骨髓间充质干细胞，研究发现，尽管两种途径均产生了大量的肝细胞，但与腹腔途径相比，肝内途径更为有效。

2.3.3 促进间充质干细胞黏附贴壁及对靶向组织的处理 黏附贴壁是移植干细胞存活、生存和有效的前提。研究发现，在移植前使间充质干细胞处于黏附贴壁状态会有利于移植后的细胞生存和向目标组织的归巢。Yang等^[62]在体外用微载体扩增间充质干细胞时发现间充质干细胞集落成巢珠样，在移植后的凋亡明显少于经胰蛋白酶处理过的间充质干细胞。沈运丽^[63]发现在细胞治疗的同时外加磁场能够促进间充质干细胞的停留、植入，进一步改善心肌梗死大鼠的心功能，而且不存在细胞栓塞的风险。研究结果显示，细胞磁靶向治疗有望成为促进移植细胞归巢的新兴策略。

尽管间充质干细胞植入体内后对血清和氧气的缺乏都十分敏感，但局部组织的缺血预处理可能反而提高间充质干细胞的归巢效率。因此，在间充质干细胞移植前或移植后对靶向组织进行相关处理可能会提高归巢率。di Bonzo等^[64]经尾静脉移植间充质干细胞给正常裸鼠和慢性肝损伤裸鼠，结果前者肝脏内移植细胞植入率较后者明显减少，由此可见适度的肝脏内炎症环境对肝细胞再生修复、移植细胞归巢和分化都有促进作用。同时多个体外实验亦提示肝脏衰竭血清有促进干细胞生长和分化的作用^[65-68]。

2.3.4 移植时间、数量 研究显示，移植时间及数量影响其归巢的效果，早期大量输注有助于提高其归巢率。Omori等^[69]研究发现，早期大量移植间充质干细胞归巢至小鼠大脑缺血性损伤数量增多，但是大脑功能改善不明显。对于刚分离出的间充质干细胞往往数量稀少，在移植间充质干细胞之前通常需要在体外进行培养扩增以增加移植的干细胞数量。为了保持间充质干细胞的干性，细胞培养条件非常重要。有研究发现，低氧条件下培养能够减少培养时氧化损伤的累积，增加基质金属蛋白酶的数量，但也有研究显示，间充质干细胞体外扩增会产生基质金属蛋白酶抑制剂3，从而影响间充质干细胞的跨内皮细胞迁移。Sotiropoulou等^[70]对比大量不同细胞培养基进行间充质干细胞体外扩增后发现，低糖DMEM、Glutamax和低密度的培养基可能更有利于间充质干细胞应用于细胞疗法。

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引言

材料方法

1.1 文献检索和筛选要求

1.1.1 检索数据库 CNKI 数据库和 PubMed 数据库。

1.1.2 检索数据库的选择理由 各为中文和英文文献较为全面的数据库。

1.1.3 检索途径、检索词及各检索词的逻辑关系 为全面、准确地检索出撰写该综述的相关文献，文章写作过程中综合考虑了检索途径、检索词的选择和各检索词间逻辑关系的配置，制定了科学的检索策略。

检索途径：关键词检索、标题检索、摘要检索、全文检索。
检索词：以“间充质干细胞，归巢”为中文检索词，以“Mesenchymal stem cells(MSCs)，homing”为英文检索词。

检索词的逻辑组配：在PubMed数据库中以“(Mesenchymal stem cells [Title]) OR (homing[Title]) ”作为检索式进行检索。在CNKI中以“(间充质干细胞 [中文标题:智能])OR(归巢 [中文标题:智能]) ”作为检索式进行检索。

检索途径、检索词、检索词的逻辑组配的确定理由：以标题检索的方式比较直接，可以快速获取相关性最高的文献。由于间充质干细胞的文献比较多，如果单纯以间充质干细胞为检索词搜索，文献整理量较大，而如果以归巢为检索词，则无关文献较多，若以“MSCs and homing”作为检索配伍，则会出现因为检索词的限制而文献源不全面。

检索的时间范围：于2015年10月1日进行检索，文献时间范围为2000至2016年。重点检索时间范围为近5年内，PubMed数据库中10年内共有文献782篇，5年内共有文献564篇，其中5年内综述103篇，临床研究110篇。CNKI数据库中10年内共有文献313篇，5年内共有文献196篇，其中5年内综述51篇。

1.2 文献筛选流程和筛选标准

1.2.1 文献筛选流程 按照图1的步骤进行。

1.2.2 文献的筛选标准 通过标题及摘要判断其主要内容与间充质干细胞归巢的机制、促进归巢的策略相关，根据被引次数，文献作者和所在期刊进行初选。

1.2.3 文献的筛选标准的制定理由 对于经典文献，在google scholar或百度学术中可以清楚的看到文献的被引次数，被引次数越高，证明文献工作认可度较高。对于新文献，一般结合文章作者和所在期刊决定，可选择在相关领域声誉较好的期刊，或通过Research Gate等网站查询期刊的影响因子。以干细胞研究为例，首选Cell Stem Cell。在下载文献后，一般将其按照影响因子+期刊名称+发表年份+文章标题命名，这样文献的重要信息一目了然，便于筛选。

1.2.4 排除的文献 搜索结果共1 096篇，排除1 022篇，剩余74篇。

1.2.5 排除理由 ①重复发表的文献。②其他组织来源的干细胞。③和间充质干细胞归巢及促进归巢无关的内容，如间充质干细胞提取、增殖、分化等。③资料无法提取的文献。

1.2.6 筛选偏离的描述、原因及对结果的影响 筛选偏离是指对原始数据的筛选缺乏具体标准，有潜在偏倚。在筛选过程中，没有其他作者筛选文献、提取资料并交叉核对，且在筛选的过程中可能无法提取资料。因而结果相对主观，受自身水平限制。

1.2.7 文献筛选结果的输出形式 文献检索和筛选结果的输出采用文献的引用形式，且保持了格式的一致性，文献的引用形式包括作者、题名、期刊名称、发表年代、卷数(期数)、页码等。经筛选纳入评价的文献提供了全文。

1.2.8 检索偏离的描述、原因及对结果的影响 检索偏离是指由于检索方法不全面，检索途径单一，无系统的检索方法和策略等，未能严格检索到所有相关文献。因而结果只能定性而不能定量。

讨论

近年来大量间充质干细胞相关成果不断涌现，尤其是难治性疾病的研究和临床应用，干细胞具有不可替代的优势。目前已有超过两百多例临床试验使用异体间充质干细胞进行研究，已经完成Ⅰ期和Ⅱ期临床试验，进入Ⅲ期临床试验，数据显示其对复杂型肛瘘，缺血性心肌病等有明显疗效^[71-72]，经治疗后症状明显好转。然而，间充质干细胞迁移穿过内皮细胞归巢至目标组织的机制还未完全清楚，大量研究表明，间充质干细胞的迁移和不同的细胞因子及其受体相关。目前研究最多的是SDF-1/CXCR4，MCP-1/CCR，HGF/c-Met，另外还有SCF-c-Kit，VEGF/VEGFR，PDGF/PDGFR，HMGB1/RAGE等与间充质干细胞的迁移、黏附相关。对基因和信号分子的进一步研究可能是明确间充质干细胞归巢机制的切入点。间充质干细胞归巢于靶向组织是间充质干细胞作为种子细胞应用于临床的前提，只有保证一定的归巢率，才能保证间充质干细胞的应用疗效，因此，积极开展促进归巢的策略也非常重要。

间充质干细胞作为前沿的治疗方式，仍存在以下问题：①间充质干细胞表型鉴定：由于间充质干细胞没有特异的抗原标志，纯化间充质干细胞尚存困难，究竟哪些细胞属于真正意义上的间充质干细胞也尚存争议，比如骨髓来源表达胚胎干细胞部分抗原标志的贴壁生长细胞是不是间充质干细胞^[73]？比如体外扩增后的间充质干细胞是不是仍属于真正意义的间充质干细胞？比如体外传代后的间充质干细胞能否保持其原有干性？②间充质干细胞归巢的机制：目前对归巢机制仍不能完全掌握，尤其是对间充质干细胞的动员机制。加强对归巢的内源性类化学诱导剂作用因素和对调节间充质干细胞归巢的信号轴研究，能够显著增强间充质干细胞治疗的有效率。③间充质干细胞归巢率低：为获得更多的细胞植入数量，研究者会选择间充质干细胞进行体外培养扩增，然而有研究表明，间充质干细胞经体外培养后，其归巢率明显降低，这可能与其生存能力下降以及与归巢相关的细胞因子表达下降有关。④间充质干细胞致癌性研究：为了保障间充质干细胞移植的安全性，应进一步观察其潜在致癌性^[74]、多分化潜能的不可调控性及免疫抑制作用。建立严格的细胞及分子生物学质量控制标准，也是间充质干细胞应用于临床安全性保障的必备措施。

深入研究其归巢机制及影响因素，尤其是间充质干细胞动员的分子机制，对深入开展间充质干细胞的基础研究，建立体外细胞归巢体系，开展间充质干细胞及转基因后移植的体内效应研究等均具有重要的意义，也将有利于其更好得应用于临床。前文已经讨论归巢相关分子机制和促进间充质干细胞归巢的策略，相信经过不断的研究和努力，终究会完善归巢机制并在临床应用中寻找新的突破。间充质干细胞来源广泛，具有体外操作简单，造血支持和免疫调节作用明确等特点以及多向分化能力，具有广阔的前景。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

间充质干细胞归巢的研究与进展

Development of mesenchymal stem cell homing

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